色谱标准品;中草药成分;制药;具有抗癌活性、高效的抗氧化生物活性
医药
提取制备方法
- 总提物的制备:将红参粉碎,以料/液比1:10(g/mL)加入75%乙醇,热回流提取3次,每次2h,过滤合并滤液,浓缩干燥得红参总提物。
- 大孔吸附树脂富集总皂苷:红参总提物加5%乙醇(料/液比1:20)溶解过滤,上样D101大孔吸附树脂柱(径高比1:8),上样体积1BV、速度2BV/h,静置吸附0.5h;先用25%乙醇洗脱10BV,再用75%乙醇洗脱15BV,收集75%乙醇洗脱液浓缩干燥得红参总皂苷。
- 微孔吸附树脂富集目标皂苷:红参总皂苷加5%甲醇(料/液比1:20)溶解过滤,上样MCIGELCHP20微孔吸附树脂柱(径高比1:10),上样体积1BV、速度2BV/h,静置吸附0.5h;先用30%甲醇洗脱8BV,再依次用含万分之五甲酸的60%、70%、80%甲醇溶液洗脱4BV、3BV、3BV,收集第4BV的60%甲醇洗脱液得目标人参皂苷A段。
- 高速逆流色谱分离纯化:目标人参皂苷A段采用溶剂体系正己烷:正丁醇:乙酸乙酯:乙醇:水(含万分之五冰乙酸)=1:2:5:1:6,静置过夜分层后超声脱气,上相为固定相、下相为流动相;固定相以20mL/min泵满管路,仪器900rpm正向旋转、柱温25℃、检测波长225nm;下相以2mL/min泵入平衡后,进样10mL浓度20mg/mL的目标人参皂苷A段溶液(等体积上、下相溶解),收集人参皂苷Ra3色谱峰流出液,浓缩干燥得产品。