用于中、重度糖尿病,营养不良,肝硬化初期等病症的治疗;治疗胰岛素依赖型糖尿病;非胰岛素依赖型糖尿病有严重感染、外伤、大手术等严重应激情况;糖尿病酮症酸中毒;糖尿病合并妊娠;营养不良、消瘦、肝硬变初期可同时静滴葡萄糖和小剂量胰岛素,以促进组织利用葡萄糖。
医药
路线1:酸醇提取减压浓缩法
- 提取、碱化、酸化:冻胰刨碎,加入2.3-2.6倍量86%-88%乙醇和5%草酸,10-15℃搅拌提取3h,离心,滤渣再用1倍量68%-70%乙醇和0.4%草酸提取2h,合并滤液;10-15℃搅拌下用氨水调pH8-8.4,压滤,及时酸化pH3.6-3.8,降温至5℃静置4h
- 浓缩、去脂、盐析:上清液减压浓缩至相对密度1.04-1.06;速热至50℃再速降至5℃静置4h,分离下层清液;调pH2-2.5,20℃搅拌加入270g/L氯化钠,保温静置得盐析物
- 精制、结晶、干燥:盐析物按干重加7倍蒸馏水溶解,再加3倍冷丙酮,4mol/L氨水调pH4.2-4.3,补丙酮至水和丙酮比例7:3,5℃以下放置过夜,过滤得滤液;滤液加氨水调pH6.2-6.4,加入体积分数3.6%的20%乙酸锌溶液,再调pH6,低温过夜,过滤得沉淀;沉淀按每克加冷2%枸橼酸50ml、65g/L乙酸锌溶液2ml、丙酮16ml,冰水稀至100ml,溶解冷至5℃以下,氨水调pH8速过滤,滤液速用10%枸橼酸调pH6,补丙酮至16%,慢速搅拌3-5h,5℃放置3-4天,离心取沉淀,水洗、丙酮乙醚脱水,干燥得结晶胰岛素
- 沉淀回收:取除酸性蛋白(pH4.2-4.3)的沉淀,加7倍冷蒸馏水搅匀,2mol/L盐酸调pH2.5,加3倍丙酮,2mol/L氨水调pH4.2-4.3,补丙酮至30%冷藏过夜;5℃以下过滤,滤液用2mol/L氨水调pH6.2,每100ml加20%乙酸锌1.8ml,调pH6低温过夜;沉淀按上述结晶步骤处理
路线2:分级提取直接锌盐沉淀
- 提取:冻胰刨碎,按100kg胰加300L82%乙醇投料,10-12℃下加6mol/L硫酸调pH2.8-3,搅拌提取0.5h,再加6mol/L盐酸调pH2,继续搅拌2.5h;残渣加150L65%乙醇,盐酸调pH2,搅拌提取2h,合并两次提取液
- 碱化、酸化、锌盐沉淀:提取液冷至0-5℃,浓氨水调pH7.8,加硅藻土板框压滤;用V盐酸:V硫酸:V水=4:1:4液酸化pH2.5,沉淀完全后虹吸清液,吊滤;清液加氯化锌液(每100kg胰加3kg,pH2.5),吊滤;清液用浓氨水调pH6.8,5℃过夜,虹吸清液后过滤收集沉淀
- 锌沉淀、脱脂、盐析、分级沉淀:沉淀加5倍蒸馏水溶解,6mol/L盐酸调pH2.7,12-15℃放置,次日放出下层清脱脂液,上层脂肪用5倍蒸馏水洗涤,回收下层清液;脱脂液盐酸调pH2.5,25℃加270g/L氯化钠盐析得粗制品;粗制品加20倍蒸馏水溶解,盐酸调pH2.5,加160g/L氯化钠盐析,过滤收集盐析物;盐析物加7倍蒸馏水溶解,加3倍丙酮,4mol/L氨水调pH4.5,0-5℃过夜,过滤得清液
- 结晶、干燥:清液用4mol/L氨水调pH6,加20%醋酸锌液(每100kg胰加30ml),析出沉淀后过滤;沉淀按配方(2%枸橼酸500ml、20%醋酸锌6.5ml、丙酮160ml、蒸馏水稀释至1000ml)处理,冷却至0-5℃,氨水调pH8过滤,滤液用10%枸橼酸调pH6,搅拌结晶2天,虹吸清液后离心收集结晶,水洗、丙酮洗各2次,五氧化二磷真空干燥得成品
路线3:基因工程法
将人胰岛素基因克隆植于大肠杆菌的脱氧核糖核酸中,利用细菌生产人胰岛素,已进入放大试生产阶段