- 拉喹莫德是由Teva制药公司与Active生物技术共同研发的免疫调节药物，主要用于治疗多发性硬化症，与治疗多发性硬化症的其他药物如干扰素、米托蒽醌相比使用方便，不良反应较弱。
- 制备
使用2-氨基-6-氯苯甲酸与光气发生成环反应，生成5-氯依托酸酐（1），然后在氢化钠的作用下与碘甲烷反应得到N-甲基-5-氯依托酸酐（2），化合物2与丙二酸二乙酯缩合反应得到5-氯-1,2-二氢-4-羟基-1-甲基-2-氧代-3-喹啉甲酸乙酯（3），化合物3在HCl条件下水解得到5-氯-1,2-二氢-4-羟基-1-甲基-2-氧代-3-喹啉甲酸（4），化合物4与N-乙基苯胺酰胺化反应得到目标化合物5，合成路线见图1。在合成化合物1时，文献采用光气作为成环反应试剂，但是因为光气毒性太大，不适合于工业生产，故改为固体光气，同时在合成化合物4时，考虑其反应机制，反应加料顺序和反应物质的量比对其反应有重要的影响。在合成化合物拉喹莫德时，考察了不同缚酸剂对反应的影响，本实验最终确定了吡啶做为缚酸剂。
拉喹莫德的合成路线
- 生物活性
Laquinimod (ABR-215062, LAQ)是有效的免疫调节剂。Phase 3。
- 靶点
NF-κB
- 体外研究
0.1-1 μM Laquinimod 处理不影响外周血单核细胞(PBMC)活性。通过在健康对象和复发缓解型多发性硬化症(RRMS)患者的PBMC中进行大规模基因表达芯片分析 ,显示 Laquinimod 抑制与抗原呈递及相应炎症通路相关的基因表达。Laquinimod作用于CD14
- 体内研究
Laquinimod 每天按0.16-16 mg/kg剂量处理Lewis 大鼠，抑制实验性自身免疫神经炎 (EAN)的发生，改善临床体征，且抑制 P0肽 180-199特定T细胞反应，及周围神经发生炎症髓鞘脱失, 说明 Laquinimod可以通过调节Th1/Th2细胞因子平衡而调节作用效果。 Laquinimod 显著抑制小鼠急性实验性自身免疫脑脊髓炎(EAE)的发展, 比免疫调节剂Roquinimex效果强20倍。 Laquinimod 作用于Lewis大鼠，抑制实验性自身免疫脑脊髓炎(EAE)的发展，这种作用存在剂量依赖性，比 Roquinimex (Linomide)抑制效果好。 Laquinimod作用于 IFN-beta k.o.小鼠和野生型小鼠，有效抑制慢性实验性自身免疫脑脊髓炎(chEAE) 的发展。 Laquinimod作用于携带MOG(35-55)肽诱导活性EAE的C57BL/6小鼠，降低临床体征，炎症和髓鞘脱失,且下调 VLA-4调节的粘附和促炎性细胞因子，如IL-17。使用在骨髓细胞和T细胞(LLF小鼠)中缺少BDNF表达的条件性 BDNF基因敲除株研究 Laquinimod 作用于EAE小鼠模型的效果，说明 Laquinimod也通过诱导脑驱动神经营养因子(BDNF)调节自身免疫髓鞘脱失。
医药
合成路线 1（1. 合成：248281-84-7）
产率：98%
合成条件：Heating / reflux
实验步骤：实施例2 [N-乙基-N-苯并-5-氯-1,2-二氢-4-羟基-1-甲基-2-氧代 - 喹啉-3-甲酰胺] [5-氯-1-]，2- [2-乙基-N-苯基-5-氯-1,2-二氢-4-羟基-1-甲基-2-氧代 - 喹啉-3-甲酰胺] 将二氢-4-羟基-L-甲基-2-氧代 - 喹啉-3-羧基]酸甲酯（3.0g），N-乙基苯胺（2当量2.88ml）和庚烷（60ml）加热并挥发物 ，主要是庚烷和形成的甲醇（32毫升），在[6]小时和35分钟内蒸馏出来。 冷却至室温后，过滤结晶悬浮液，用庚烷洗涤晶体，真空干燥，得到粗标题化合物（3.94g，98％），为白色至灰白色晶体。
参考文献：
- [1] Patent: WO2003/106424, 2003, A1. Location in patent: Page 6 [2] Patent: WO2003/106424, 2003, A1. Location in patent: Page 6 [3] Patent: US2004/34227, 2004, A1. Location in patent: Page 3 [4] Patent: US2004/34227, 2004, A1. Location in patent: Page 3
合成路线 2（2. 合成：248281-84-7）
产率：87%
合成条件：Stage #1: With sodium methylate In tetrahydrofuran; methanol for 2 h; Inert atmosphere; Reflux Stage #2: With water; sodium hydroxide In methanol at 5℃; for 0.50 h; Stage #3: With hydrogenchloride In methanol; water
实验步骤：b）。 在N 2气氛下，向搅拌的（9）（10mmol）的无水THF（50ml）溶液中分批加入甲醇钠（3.6mmol，0.5M，在MeOH中），并将所得混合物回流2小时。 冷却混合物，部分蒸发溶剂，得到含有不溶性盐的浓缩溶液。 将其溶于甲醇（30ml），10M NaOH（1.07mL，10.7mmol）和水（15.0ml）的混合物中。 然后，加入5M HCl（aq）（2.4ml，12.0mmol）。 收集结晶沉淀，用冷甲醇洗涤并干燥，得到所需化合物，产率87％，测定值为98.9％。
参考文献：
- [1] Patent: WO2012/70051, 2012, A1. Location in patent: Page/Page column 27
合成路线 3（3. 合成：248281-84-7）
产率：96%
合成条件：With hydrogenchloride In water
实验步骤：将0.8g拉喹莫德-Na溶于75ml水（HPLC级）中。在搅拌下，逐滴加入HCL溶液（25％）直至不再发生沉淀。 过滤沉淀的拉喹莫德游离酸，然后用水洗涤3次。 将白色残余物在室温下在层流下干燥过夜。 产量为0.72g，相当于96.0％。
参考文献：
- [1] Patent: WO2014/152009, 2014, A1. Location in patent: Page/Page column 17 [2] Patent: US2007/88050, 2007, A1. Location in patent: Page/Page column 5
