- 生物活性
Linifanib (ABT-869)是一种新型，有效，ATP竞争性VEGFR/PDGFR抑制剂，同时抑制KDR， CSF-1R， Flt-1/3和PDGFRβ，其IC50分别为4 nM， 3 nM， 3 nM/4 nM和66 nM ，对具有突变激酶依赖性的癌细胞（即FLT3）最有效。Phase 3。
- 体外研究
在激酶实验中，Linifanib抑制Kit, PDGFRβ和Flt4，IC50分别为14 nM, 66 nM 和 190 nM。在细胞水平，Linifanib 也抑制配体诱导的KDR, PDGFR-β, KIT,和 CSF-1R磷酸化，IC50分别为2 nM, 2 nM, 31 nM 和10 nM，这种细胞效力可被血清蛋白影响。ABT-869抑制VEGF-刺激的HUAEC增殖，IC50为0.2 nM。然而，ABT-869作用于不受VEGF或PDGF诱导的肿瘤细胞时活性很弱，除了作用于MV4-11白血病细胞(具有组成型活性形式Flt3)，IC50为4 nM。Linifanib作用于MV4-11细胞，降低 S 和G2-M 期细胞凋亡数，提高sub-G0-G1 期细胞凋亡数。Linifanib 结合到CSF-1R的ATP结合位点，K
i
为3 nM。Linifanib(10 nM) 作用于Ba/F3 FLT3 ITD细胞，降低Akt在Ser473位点磷酸化，且降低GSK3β在Ser9位点磷酸化。
- 体内研究
Linifanib(0.3 mg/kg) 在肺组织中完全抑制KDR 磷酸化。Linifanib也抑制水肿反应，ED50为0.5 mg/kg。Linifanib(7.5 和15 mg/kg, 每天两次)在角膜上显著抑制bFGF-和VEGF诱导的血管生成。Linifanib作用于移植瘤模型，包括HT1080, H526, MX-1 和 DLD-1，抑制肿瘤生长，ED75 为4.5-12 mg/kg。Linifanib在低剂量时也高效作用于A431和MV4-11移植瘤。Linifanib(12.5 mg/kg 每天两次)作用于MDA-231 移植瘤，微脉管密度降低。Linifanib 作用于HT1080纤维肉瘤模型，C
max
和AUC
24小时
分别为0.4 μg/mL 和 2.7 μg•hour/mL。
- 生物活性
Linifanib (ABT-869, AL39324, RG3635)是一种新型有效的ATP竞争性VEGFR/PDGFR抑制剂，作用于KDR，CSF-1R，Flt-1/3和PDGFRβ，其IC50分别为4 nM，3 nM，3 nM/4 nM和66 nM，对突变激酶依赖性癌细胞（即FLT3）最有效。Linifanib (ABT-869) 可诱导自噬和凋亡。Phase 3。
- 靶点
Target
Value
VEGFR1/FLT1
(Cell-free assay)
3 nM
CSF-1R
(Cell-free assay)
3 nM
VEGFR2/KDR
(Cell-free assay)
4 nM
FLT3
(Cell-free assay)
4 nM
Kit
(Cell-free assay)
14 nM
- 体外研究
在激酶实验中，Linifanib抑制Kit, PDGFRβ和Flt4，IC50分别为14 nM, 66 nM 和 190 nM。在细胞水平，Linifanib 也抑制配体诱导的KDR, PDGFR-β, KIT,和 CSF-1R磷酸化，IC50分别为2 nM, 2 nM, 31 nM 和10 nM，这种细胞效力可被血清蛋白影响。ABT-869抑制VEGF-刺激的HUAEC增殖，IC50为0.2 nM。然而，ABT-869作用于不受VEGF或PDGF诱导的肿瘤细胞时活性很弱，除了作用于MV4-11白血病细胞(具有组成型活性形式Flt3)，IC50为4 nM。Linifanib作用于MV4-11细胞，降低 S 和G2-M 期细胞凋亡数，提高sub-G0-G1 期细胞凋亡数。Linifanib 结合到CSF-1R的ATP结合位点，K
i
为3 nM。Linifanib(10 nM) 作用于Ba/F3 FLT3 ITD细胞，降低Akt在Ser473位点磷酸化，且降低GSK3β在Ser9位点磷酸化。
- 体内研究
Linifanib(0.3 mg/kg) 在肺组织中完全抑制KDR 磷酸化。Linifanib也抑制水肿反应，ED50为0.5 mg/kg。Linifanib(7.5 和15 mg/kg, 每天两次)在角膜上显著抑制bFGF-和VEGF诱导的血管生成。Linifanib作用于移植瘤模型，包括HT1080, H526, MX-1 和 DLD-1，抑制肿瘤生长，ED75 为4.5-12 mg/kg。Linifanib在低剂量时也高效作用于A431和MV4-11移植瘤。Linifanib(12.5 mg/kg 每天两次)作用于MDA-231 移植瘤，微脉管密度降低。Linifanib 作用于HT1080纤维肉瘤模型，C
max
和AUC
24小时
分别为0.4 μg/mL 和 2.7 μg•hour/mL。
医药
合成路线 1（1. 合成：796967-16-3）
产率：74.8%
合成条件：With dichloro(1,1'-bis(diphenylphosphanyl)ferrocene)palladium(II)*CH 2 Cl 2 ; sodium carbonate In ethanol for 8 h; Reflux
实验步骤：将实施例3中得到的式VI化合物（10.6g，28.6mmol）依次加入到反应烧瓶中.3-氨基-4-碘咔唑（8.1g，31.3mmol），碳酸钠（7.6g，71.7mmol），100 mL乙醇，100mL水。 在室温下搅拌下加入PdCl 2（dppf）（0.4g，0.6mmol）并将温度升至回流。 回流8小时后，减压蒸馏除去乙醇。 将乙酸乙酯（150mL）和20％氯化铵水溶液（50mL）加入到残余物中，然后搅拌30分钟。 分离有机层，用水洗涤3次，并用无水硫酸钠干燥。 减压蒸发有机层至干，所得粗产物用二氯甲烷 - 乙醇（10：1）重结晶，得到8.0g白色固体，产率74.8％。 HPLC纯度为99.0％。 MS（ESI）m / z：（M + H）= 376.4。
参考文献：
- [1] Patent: CN103570754, 2018, B. Location in patent: Paragraph 0176-0179 [2] Organic Process Research and Development, 2009, vol. 13, # 6, p. 1419 - 1425 [3] Journal of Medicinal Chemistry, 2007, vol. 50, # 7, p. 1584 - 1597 [4] Chemical Communications, 2015, vol. 51, # 29, p. 6384 - 6387
