16α-羟基泼尼松龙是糖皮质激素原料药中间体,用于合成已上市的奈德类药物(如曲安奈德、布地奈德、环索奈德和地索奈德),这些药物为吸入型糖皮质激素类,局部抗炎作用强、全身副作用小,广泛用于治疗顽固性哮喘和炎症。
医药
路线1:生物转化法
- 菌株:玫瑰产色链霉菌(Streptomyces roseochromogenes),菌株编号CGMCC No.4.616,购自中科院微生物所菌种保藏中心。
- 培养基:斜面培养基为PDA基础培养基;种子培养基含葡萄糖0.8%、可溶性淀粉2.0%、酵母浸粉0.5%、黄豆粉3%、KH₂PO₄0.2%、氯化钠0.05%,pH 6.5;发酵培养基含葡萄糖1.0%、可溶性淀粉5.0%、蛋白胨0.5%、黄豆粉3%、KH₂PO₄0.02%、硫酸镁0.05%、硫酸锌0.05%,pH 6.5。
- 培养方法:菌种斜面27-28℃培养4-5天,用无菌水制备孢子悬液(浓度1×10⁶-1×10⁷/mL);接种至种子培养基24h,再转接入发酵培养基(接种量5%),28℃、220r/min培养24h后,加入终浓度5mg/mL的泼尼松龙,继续转化24h。
- 底物制备:1g泼尼松龙加50mL 75%乙醇超声溶解,制成20mg/mL储备液,4℃保存。
- 检测方法:发酵液1mL加2mL甲醇超声10min,4000r/min离心10min,上清液过滤后用HPLC分析(C18柱,乙腈:水=25:75,流速1mL/min,检测波长245nm)。