作为混塑型聚氨酯橡胶的抗水解剂和抗氧剂,改善硫化胶稳定性,延缓胶料水解;用于酶固定化,通过与载体羧基反应产生高活性衍生物,实现酶与载体耦联
聚氨酯弹性体抗水解剂、抗氧剂;酶固定化(酸性磷酸酶、葡糖淀粉酶、葡糖氧化酶、索青霉纤维酶、碱性磷酸酶等)
碳化二亚胺法(酶固定化)
- 原理:水溶性碳化二亚胺(如EDC、CMC)与载体/酶蛋白羧基反应,生成高活性0-酰基异脲衍生物,实现酶与载体的共价交联固定。
- 常用试剂:1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)-碳化二亚胺(EDC)、1-环己烷基-3-(2-吗啉代-乙基)-碳化二亚胺-N-甲基-P-苯-硫酸(CMC)。
- 固定化类型:
- 二步法(最常用):先将载体用碳化二亚胺活化,洗涤后加入酶,4℃、pH7下反应4-16h。
- 一步法:载体与酶混合后加入碳化二亚胺,直接进行固定化。
- 酶预处理法:酶先用碳化二亚胺处理(作用于酶蛋白羧基),再固定到载体氨基上。
- 应用实例:
- 酸性磷酸酶:用CMC和EDC一步法固定到聚丙烯酸-聚乙烯共聚物上。
- 葡糖淀粉酶/葡糖氧化酶:用EDC固定到活性炭上。
- 索青霉纤维酶:EDC(pH4.8,0℃,18h)固定到可溶性PVA上。
- 碱性磷酸酶:以ε-氨基己酸为分隔分子,EDC固定到聚苯乙烯胶乳颗粒上。
- NAD固定:CMC介导(pH5,500mg CMC/100mg NAD,21℃,24h)将分隔分子修饰后的N6-羧甲基NAD固定到部分水解的尼龙网膜上。