常用于重组细菌菌落的蓝白筛选,与X-Gal或Bluo-Gal结合使用,诱导lac操纵子在大肠杆菌中的表达;作为β-半乳糖苷酶和β-半乳糖透酶的诱导剂,不被β-半乳糖苷水解,是硫代半乳糖转酰酶的底物;用于需要诱导β-半乳糖苷酶活性的克隆实验,IPTG与lacI阻遏蛋白结合改变构象,防止β-半乳糖苷酶编码基因lacZ的抑制。
生命科学研究; 分子生物学实验
路线1:
- 原料:异丙基-β-D硫代乙酰基半乳糖苷(52 mmol,21.4 g)
- 试剂:甲醇钠溶液(pH=10)
- 条件:室温(20℃)搅拌12-24小时,TLC监测反应
- 后处理:减压蒸除溶剂,甲醇和丙酮重结晶
- 收率:98%
- 参考文献:CN103087121, 2018;Liebigs Annalen der Chemie, 1983;Bioorganic and Medicinal Chemistry, 2005;CN103694284, 2016;CN103694286, 2016
路线2:
- 原料:半乳糖(1 mol)、异丙基硫醇(1.1 mol)、乙酸酐(5.5 mol)、三氯化铝(1 mol)、甲醇(10 mol)、甲醇钠(0.01 mol)、乙酸(0.01 mol)
- 条件:5-10℃分12批加入半乳糖,反应后加入异丙基硫醇;0-5℃水中搅拌10小时;甲醇钠甲醇溶液反应
- 后处理:加入乙酸后处理,二氯甲烷萃取,水洗涤,浓缩后结晶
- 收率:74.3%
- 参考文献:CN103694286, 2016
路线3:
- 原料:五乙酰基半乳糖(0.51 mol)、异丙基硫醇(1.25 mol)、三氟化硼乙醚(0.75 mol)、甲醇(10 mol)、甲醇钠(0.01 mol)、乙酸(0.01 mol)
- 条件:0-5℃二氯甲烷中反应2小时(三氟化硼乙醚);甲醇钠甲醇溶液反应