61970-00-1 荧光素酶

WGK Germany:3，F:3-10-21，存储类别:11 - 可燃固体，危险性类别:呼吸道致敏物 类别1

荧光素酶应用于生物发光免疫分析技术(BLIA)，可检测特殊细菌、厌氧微生物，监控生长缓慢微生物，用于食品、饮料、自来水、化妆品、药物检测，河流水质、大气环境监测，还可作为细菌荧光素酶报告系统替代物监测环境应激。

医学; 生物学; 环境科学; 食品饮料检测; 水质监测; 大气环境监测

路线1：基因工程表达（萤火虫荧光素酶）

• 步骤: 1985年deWet等首次克隆P.Pyralis的FL基因，在大肠杆菌(E.coli)中表达；1986年测定FL基因cDNA序列，后续各种发光甲虫FL基因相继克隆成功并在原核和真核表达系统表达。取自P.Pyralis长约1.8kb的cDNA基因在E.coli表达产物为分子量62kD、含550个氨基酸的多肽链，与自然提取FL反应动力学特性、发射波长及稳定性无差异。
• 条件: 转化体在37℃、LB培养基中生长到对数后期收集菌体，用渗透压法、冻融法提取细菌胞质组分，经均质、离心，用凝胶排阻、离子交换色谱提取纯酶，冷冻干燥保存。

路线2：直接提取（细菌荧光素酶）

• 步骤: 从培养发光细菌直接提取得到BL，制备方法与FL类似。
• 条件: 从V.harveyi中提取的酶活可达1.8×10¹¹LU/mg，特殊用途BL可通过诱变或基因克隆得到。